PEI轉染手冊

轉染操作流程：
 
  1、細胞傳代：

轉染前24h內分離293T細胞至含10％胎牛血清的DMEM培養基 中進行傳代培養，接種密度如下：
         6孔板：0.5x10⁶細胞
         10cm培養皿：4.0x106細胞
         15cm培養皿：9.0x106細胞

2、轉染

轉染前將所有試劑置于室溫。

2.1質粒DNA的稀釋

在無菌試管中，用無血清的DMEM W / O酚紅培養基（濃度為10％）稀釋質粒DNA（ug）。病毒包裝體（psPAX2）：病毒包膜（pMD2G）和重組質粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
       

6孔板：200ul+3ug的DNA
        10cm培養皿：1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養皿：2ml+11-12ug的DNA

   2.2 轉染復合體形成

將PEI（1ug/uL）加入已稀釋的總DNA中，PEI與DNA（ug）的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
      

 6孔板：9ul PEI復合體（1ug/ul）=9ug
        10cm培養皿：21ul PEI復合體（1ug/ul）=21ug
        15cm培養皿：33ul PEI復合體（1ug/ul）=33ug
將添加到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。

4、收獲轉染細胞

轉染后48小時內收獲轉染細胞/或病毒上清。
 
試劑的配制：
PEI（1ug/ul） Polysciences（CAT＃23966-2配制成儲液：)
1、將無內毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI，冷卻到室溫。
2、調整pH值至7.0，用0.22um的濾器過濾消毒，分裝后儲存在-20℃。工作液可保持在4℃

訂貨信息

友情提醒：
Polyethylenimine, Linear (MW 25,000) 23966-2為Polysciences公司生產的化合物產品，每批產品出廠前都經過嚴格的檢測,保證每批產品都*、穩定且高品質,但由于作為轉染試劑使用過程中有很多實驗室因素(PH,水純度,稱量的準度,dna純度…)造成溶解出現問題或者轉染效率出現差異,所以廠家只受理該產品純度，分子量及重量缺失破損等相關投訴，針對極個別客戶溶解問題和轉染效率問題我們只能友善解決,所以不能保證您能獲得滿意答復，對于產品應用方法的問題，不作為評價我們售后工作的依據。
如果我們提供的PEI手冊都無法解答您的問題,建議您可以多看文獻,多調整一下轉染條件,找出適合自己細胞的轉染方法。如果無暇摸索條件,您也可以直接購買我們EZ Trans細胞轉染液,這樣免去您很多煩惱,謝謝理解

Polysciences 23966-2  Polyethylenimine, Linear (MW 25,000)   大量現貨，*

我們公司zui大優勢是強大的采購，

1：基本什么都能進口，血清，抗體，耗材，還有部分限制進口的，

2：貨品全，現經營過700多個品牌，基本所有生物試劑耗材都可以進口，特別是冷偏的產品那就更有優勢，

3：提供加急服務，一般1-2周到貨，超過時限加急費全免

4：價格公道，絕大部分價格有優勢，當然不能保證100%產品都是,因為意味著沒有服務.

5：良好的信譽，大部分客戶我們提供貨到付款服務，客戶包括清華，北大 交大 復旦，中山等100多所大學，ROCHE，阿斯利康，國藥 ，fisher等500多家公司

6：我們*代理的品牌有：Antibody Research Corporation，arcticzymes，Biorelevant，chiralix，clemente-associates，clodronaiposomes，Columbia Biosciences，enzyme research，Gene Bridges GmbH，Genovis，Glycotope Biotechnology GmbH，Haematologic Technologies HTI Haemtech，hookelabs，Immudex，Innovative Research of America，inspiralis ，List Biological Laboratories, Inc.，lumafluor，Microsurfaces，multiplicom，nanotools，Pel-Freez Biologicals，pentapharm，progen，Protein Ark，QA-Bio,Inc，QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences，Teknova，TriLink BioTechnologies, Inc.，Zyagen Laboratories 等