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Haematologic HCV-0100說明書

發(fā)布時間:2018/11/3      點擊次數(shù):1147

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

 

Coagulation Factor V

凝血因子V.

 

 

通過α-凝血酶
活化因子V表示α-凝血酶對單鏈因子V(330,000)的活化。箭頭表示凝血酶切割因子V的位點,除了形成Va的重鏈(94,000)和輕鏈(74,000)外,還產(chǎn)生兩個活化肽(71,000和120,000)。因子Va的重鏈和輕鏈仍然存在在鈣離子存在下非共價結(jié)合。

HCV-0100 Human Factor V

Size

50 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

BCV-1100 Bovine Factor V

Size

100 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

 

 

因子V是一種大的單鏈血漿糖蛋白,它是血液凝固級聯(lián)中的必需成分(1)。在凝血過程中,通過絲氨酸蛋白酶α-凝血酶的有限蛋白水解(如上所述),將因子V的因子V轉(zhuǎn)化為活性輔因子因子,并且因子Xa的效率較低。活性輔因子由NH2-末端衍生的重鏈(Mr = 94,000)和COOH-末端衍生的輕鏈(Mr = 74,000)組成,其在鈣離子存在下保持非共價結(jié)合。因子Va用作絲氨酸蛋白酶因子Xa的輔因子。因子Va和Xa以非共價和鈣離子依賴性方式在磷脂表面上組裝,以形成凝血酶原酶復(fù)合物。凝血酶原酶復(fù)合物負(fù)責(zé)將酶原凝血酶原快速轉(zhuǎn)化為活性絲氨酸蛋白酶α-凝血酶。凝血酶原酶復(fù)合物的組裝相對于單獨的因子Xa的速率,凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶的速率提高了近300,000倍。通過活化蛋白C使因子Va失活,部分地實現(xiàn)了凝血酶原酶復(fù)合物的下調(diào)。

如Katzmann及其同事所述,使用免疫親和層析從新鮮冷凍的人血漿制備人因子V.(2)。使用Nesheim及其同事描述的常規(guī)色譜技術(shù)從新鮮牛血漿制備牛因子V.(3)。純化因子V以50%甘油(體積/體積)提供,應(yīng)儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析測定純度,并在因子V凝固測定中測量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子V,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說明

因子V是一種非常不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。一些降解的碎片通常在制劑中是顯著的。

 

本土化

血漿和血小板

血漿濃度

7.0μg/ ml(人)(4,5)
35μg/ ml(牛)(5)

行動方式

Procofactor; 由凝血酶激活形成活性輔因子,因子Va

分子量

330,000(3) - (根據(jù)牛因子V確定)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 9.6(3) - (根據(jù)牛因子V確定)

 

結(jié)構(gòu)體

一個亞基,2196個氨基酸(1,6) - (根據(jù)人因子V確定)

碳水化合物百分比

約25%(基于計算的人因子V的分子量)

參考

  • Mann,KG,et al。,Ann。Rev.Biochem。,57,915(1988)。
  • Katzmann,JA,et al。,Proc。國家科。科學(xué)院。科學(xué)。美國,78,162(1981)。
  • Nesheim,ME,et al。,J.Biol。Chem。,254,508(1979)。
  • Tracy,PB等,Blood,60,59(1982)。
  • Nesheim,ME等人,Methods Enzymol。,80,249(1981)。
  • Jenny,RJ,et al。,Proc。國家科。科學(xué)院。科學(xué)。美國,84,4846(1987)

出版物

  • Ofosu,F(xiàn).,et al。,Biochem。J.(1992)283,893-897。(因子V激活)
  • Ainle,F(xiàn).,et al。,Blood。2009 114:1658-1665(抑制因子V激活)
  • Weeterings,C.,et al。,Blood 2008 112:3227-3233(凝血酶代)
  • Yang,X。等,Biochem。J.(1990)272,399-406(因子V的激活)

 

 

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