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biodatacorp UPTT檢測(cè)試劑 操作手冊(cè)

發(fā)布時(shí)間:2018/4/19      點(diǎn)擊次數(shù):2153

UPTT™ 未激活的部分凝血活酶時(shí)間檢測(cè)使用說(shuō)明書(shū)

 

貨號(hào):105997

品名:UPTT™ 檢測(cè)試劑

 

檢測(cè)試劑基本信息

 

產(chǎn)品描述:

UPTT是標(biāo)準(zhǔn)化凍干兔腦腦磷脂(部分凝血活酶),磷脂濃度≤0.1%,可代替血小板提供凝血催化表面,是進(jìn)行活化部分凝血酶時(shí)間測(cè)試的理想試劑。該試劑符合包括ASTM F2382-01,04,12,F(xiàn)DA藍(lán)皮書(shū)備忘錄E95-1和ISO 10993-4中規(guī)定的血液相容性評(píng)估要求。

 

 

用途:

生物相容性或?qū)ι挠绊懯轻t(yī)療或血管設(shè)施是否適合于體內(nèi)使用的關(guān)鍵衡量指標(biāo),UPTT檢測(cè)試劑用于體外測(cè)定未激活的部分凝血活酶時(shí)間,通過(guò)測(cè)量關(guān)鍵凝血酶活性來(lái)特異性評(píng)估醫(yī)用設(shè)備和材料對(duì)血液或血液相容性的影響。

 

 

檢測(cè)原理:

在缺乏鈣離子的情況下,全血暴露在外源物質(zhì)時(shí)發(fā)生接觸激活[1,2,3]。UPTT通過(guò)檢測(cè)凝血時(shí)間來(lái)測(cè)量參與內(nèi)源性血漿促凝血酶原生成的血漿因子[4,5]。該檢測(cè)應(yīng)重復(fù)三次,將檢測(cè)結(jié)果與非處理血漿和陰性對(duì)照進(jìn)行比較。

 

 

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):

UPTT試劑已經(jīng)過(guò)手動(dòng)和光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)試,具有可靠的精度和靈敏度,可為基于接觸活化的血液相容性和血栓形成試驗(yàn)提供可靠的結(jié)果[1.3,6,7]

 

 

試劑盒包含:

20 x 3.0mL的UPTT試劑,

含約~0.1%兔腦腦磷脂,緩沖液和穩(wěn)定劑。

 

 

試劑儲(chǔ)存

凍干的UPTT試劑在2-8°C儲(chǔ)存直至有效期;在原容器懸的UPTT試劑可于2-8°C密閉儲(chǔ)存7天。

 

 

 

注意事項(xiàng)

1試劑不用于人體或動(dòng)物診斷測(cè)試。

2在整個(gè)試劑準(zhǔn)備,樣本收集,樣本制備和分析過(guò)程中須嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施

3根據(jù)實(shí)驗(yàn)室管理制度處理銳器如針頭等和生物廢物。

 

 

額外所需材料(本試劑盒未提供):

1.純化水,pH 5.3 - 7.2(蒸餾水,去離子水或試劑級(jí))

2.移液器(10ml, 3ml和0.1mL)。

3.氯化鈣,0.025M(C / N 100989)

4.檸檬酸鈉,0.11M(C / N 100994)

5.凝血參照血漿

 

檢測(cè)準(zhǔn)備

 

 

試劑配制:

在試劑配制前將UPTT小瓶置于室溫。

1.輕輕敲擊小瓶使附著在塞子上的試劑掉于瓶底;

2.取下鋁質(zhì)密封圈

3.取出塞子,用3.0 mL純凈溶解小瓶?jī)?nèi)容物。

4.蓋上塞子并翻轉(zhuǎn)小瓶以*混合內(nèi)容物。在使用前至少要保持15分鐘以確保內(nèi)容物*溶解。

注意:試劑一旦配置完成,在2 - 8°C儲(chǔ)存在密封的原始容器中可穩(wěn)定7天。

 

 

測(cè)試血漿的采集:

UPTT檢測(cè)樣本必須是由抗凝血全血制備的無(wú)血小板或貧血小板血漿[8-10]

樣本采集

采血時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎,當(dāng)血液在收集中可見(jiàn)時(shí)立即釋放止血帶,避免停滯,溶血,組織液污染或暴露于玻璃表面。

建議使用[10]

1.采用實(shí)驗(yàn)室的蝶翼式采血管套,
2.將血液抽入含有0.11M檸檬酸鈉抗凝血?jiǎng)?/span>的真空塑料標(biāo)本收集管

3. 輕輕顛倒試管4-5次混勻樣本。

注意:確認(rèn)使用的抗凝劑類型和濃度彩色標(biāo)本管頭不能*顯示檸檬酸鹽濃度。

 

注射器采血可選[11]

1.采用實(shí)驗(yàn)室的蝶翼式采血管套,

2.抽取9.0mL血液進(jìn)入塑料注射器中避免吸力過(guò)大。

3.取下針頭,立即輕輕地將血液加入到含有1.0mL 0.11M檸檬酸鈉(血液抗凝血劑為9:1)的聚丙烯管中,

4..蓋上試管并輕輕顛倒4-5次混合

5.在測(cè)試前在室溫下樣品zui多保持2小時(shí)。

 

血小板血漿制備(以下兩種方法均可)

(一)PDQ®血小板功能離心機(jī)

1.將樣品放入PDQ,

2.選擇PFP設(shè)置,

3.按開(kāi)始鍵。

 

 

(二)臺(tái)式離心機(jī)制備貧血小板血漿[10,12-14]

1.將樣品放入離心機(jī)中

2.在2500×g離心15分鐘。

收獲樣品

1.使用塑料移液器

2.小心地吸取貧血小板血漿,小心接觸白細(xì)胞層(白膜層)。

3.將樣品轉(zhuǎn)移到塑料管并蓋上蓋子。

4.樣品在測(cè)試前可以在15 - 28°C下保存zui多兩個(gè)小時(shí)。

 

 

注意事項(xiàng):

(1)廢棄管的收集應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室管理制度。

(2)當(dāng)紅細(xì)胞壓積<30%或> 55%時(shí)需根據(jù)樣本的血細(xì)胞比容調(diào)整標(biāo)本體積使血液抗凝劑9比1[4,10,15]

(3)在手術(shù)過(guò)程中,不要將全血樣本或測(cè)試樣本暴露在玻璃表面[12,14]

(4)不要對(duì)明顯溶血,黃疸或脂血癥的樣品進(jìn)行UPTT測(cè)試。[10]

注意:為獲得*檢測(cè)結(jié)果,溶解的UPTT試劑的應(yīng)在使用前一刻通過(guò)磁力攪拌或輕輕顛倒混勻,或使用塑料涂層的一次性攪拌棒攪拌。

 

檢測(cè)步驟

 

 

部分凝血活酶時(shí)間終點(diǎn)可通過(guò)凝血分析儀和手動(dòng)凝血方法檢測(cè)。

凝血分析儀檢測(cè)法

凝血分析儀測(cè)試方法與用于激活的部分凝血活酶時(shí)間測(cè)試(aPTT)的方法相同,按照儀器說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)即可。注意必須采用實(shí)驗(yàn)室測(cè)試的UPTT參考范圍[16],所有測(cè)試應(yīng)重復(fù)進(jìn)行三次。 間接血液接觸的檢測(cè)設(shè)備需要1克樣品,直接血液接觸的檢測(cè)設(shè)備需要2.5克樣品。 必須控制檢測(cè)中設(shè)備與測(cè)試樣品接觸的時(shí)間。

 

 

手動(dòng)檢測(cè)

注意:此測(cè)試程序適用于手動(dòng)方法,如使用自動(dòng)或半自動(dòng)分析儀,請(qǐng)按照分析儀操作手冊(cè)中的說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.將0.1mL測(cè)試或?qū)φ?/span>血漿移入測(cè)試比色杯中,并在37℃下孵育血漿2分鐘

2.在37℃下預(yù)孵育0.025M氯化鈣

3.將0.1mL UPTT試劑移入含有血漿的測(cè)試容器中。

4.在37°C孵育血漿/試劑混合物2到5分鐘或根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)方案確定。

5.加入0.1mL預(yù)孵育的氯化鈣,同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。

6.記錄凝血時(shí)間

所有測(cè)試應(yīng)重復(fù)進(jìn)行三次。 間接血液接觸的檢測(cè)設(shè)備需要1.0克樣品,直接血液接觸的檢測(cè)設(shè)備需要2.5克樣品。 必須控制檢測(cè)中設(shè)備與測(cè)試樣品接觸的時(shí)間。

 

檢測(cè)結(jié)果

 

 

UPTT測(cè)試凝血終點(diǎn)的結(jié)果應(yīng)以秒為單位。測(cè)試和參照均應(yīng)重復(fù)測(cè)試三次,結(jié)果取平均值,然后與實(shí)驗(yàn)室已建立的參考范圍進(jìn)行比較。[12,14,15,17]

測(cè)試結(jié)果中應(yīng)包括表示測(cè)試有效性的p值,比較未暴露血漿的平均結(jié)果與暴露于檢測(cè)裝置的血漿的結(jié)果,要通過(guò)測(cè)試,設(shè)備統(tǒng)計(jì)的p值必須≥0.05。

預(yù)期結(jié)果,正常血漿和對(duì)照1,2和3的CV應(yīng)小于5%。

正常血漿: >60

Level 1: >60

Level 2: > 90

Level 3: >120

注意:使用UPTT在光電光分析儀上用正常對(duì)照血漿進(jìn)行測(cè)試時(shí),結(jié)果將大于60秒,接觸激活會(huì)縮短這一時(shí)間。由于檢測(cè)方法和分析儀/人員之間的操作的差異,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須為UPTT檢測(cè)建立參考范圍。實(shí)驗(yàn)方案,樣品制備和終點(diǎn)確定方法均可能會(huì)影響測(cè)試結(jié)果。

 

 

影響因素:

UPTT測(cè)試結(jié)果的度和準(zhǔn)確性可能受到許多因素的影響。實(shí)驗(yàn)方案和實(shí)驗(yàn)室間的差異來(lái)自用于測(cè)量凝固終點(diǎn)的凝血系統(tǒng)的數(shù)量.5,15在同一實(shí)驗(yàn)室中影響測(cè)試結(jié)果的因素包括用于溶解試劑的純凈水的pH值,移液技術(shù),孵育時(shí)間和溫度的把握,試劑污染或試劑批號(hào)的變化等[18,19]。定期進(jìn)行質(zhì)量控制測(cè)試有助于確定和排除影響測(cè)試結(jié)果的因素。

 

 

世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 Bio/Data Corporation正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國(guó)代理, Bio/Data Corporation在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國(guó)科研客戶帶來(lái)高質(zhì)量的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約 Bio/Data Corporation就是為了給廣大科研客戶帶來(lái)更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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Bio / Data公司成立于1969年,在凝聚分析儀中使用光學(xué)和動(dòng)力學(xué)凝塊檢測(cè)技術(shù),并于1974年推出了*臺(tái)自動(dòng)血小板聚集儀。Bio / Data專注于創(chuàng)建儀器,技術(shù)和試劑,為醫(yī)療專業(yè)人員提供可靠的檢測(cè)結(jié)果,用于評(píng)估止血和血小板功能障礙的各個(gè)階段,包括馮維勒布蘭德氏病和格蘭仕曼氏病,并監(jiān)測(cè)抗血小板藥物如Plavix ®和阿司匹林。

 

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