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Promega ONE-Glo™ Luciferase Assay System (貨號 E6120) 中文說明書

更新時間:2026-04-23      點(diǎn)擊次數(shù):41

第一部分:產(chǎn)品描述

品牌(Brand): Promega

英文名(English Name): ONE-Glo™ Luciferase Assay System

中文名(Chinese Name): ONE-Glo™ 螢光素酶檢測系統(tǒng)(亦常被稱為ONE-Glo™ 螢光素酶報告基因均相檢測試劑盒)

貨號(Catalog Number): E6120

規(guī)格(Size): 100ml(系統(tǒng)總?cè)萘浚?100ml ONE-Glo™ Luciferase Assay Buffer 以及 1瓶(vial)凍干態(tài)(lyophilized)的 ONE-Glo™ Luciferase Assay Substrate。

預(yù)期用途: 本品僅供科學(xué)研究使用,不得用于人體診斷、治療或其他臨床程序。本系統(tǒng)專為哺乳動物細(xì)胞中螢火蟲(Firefly)螢光素酶報告基因的表達(dá)定量而設(shè)計(jì),采用均質(zhì)(Homogeneous)的一步法檢測原理。

Promega ONE-Glo™ Luciferase Assay System (貨號 E6120) 中文說明書

第二部分:產(chǎn)品概述與背景

在分子生物學(xué)、藥理學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中,科學(xué)家經(jīng)常需要追蹤特定基因在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況。為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),研究人員開發(fā)出了“報告基因(Reporter Gene)"技術(shù)。其中,螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase,簡稱 Fluc)因其催化反應(yīng)能夠產(chǎn)生強(qiáng)的生物發(fā)光信號,且背景噪音極低,成為了極受歡迎的報告基因工具。

然而,隨著現(xiàn)代藥物篩選和基因組學(xué)研究的飛速發(fā)展,科研工作者對實(shí)驗(yàn)通量提出了高的要求。傳統(tǒng)的螢光素酶檢測試劑往往存在諸多局限:例如試劑配制后極不穩(wěn)定、發(fā)光信號衰減過快導(dǎo)致無法完成大規(guī)模連續(xù)讀數(shù)、對細(xì)胞培養(yǎng)基中的成分(如酚紅、血清、抗氧化劑等)高度敏感導(dǎo)致假陰性,以及在手工或機(jī)械臂加樣過程中極易產(chǎn)生泡沫干擾信號等。

正是為了攻克上述技術(shù)瓶頸,Promega 公司依托其深厚的酶工程與生物化學(xué)底蘊(yùn),研發(fā)推出了 ONE-Glo™ Luciferase Assay System。該系統(tǒng)采用了一種全新的螢光素酶底物化學(xué)配方。它不僅大幅提升了試劑在溶解后的物理和化學(xué)穩(wěn)定性,還顯著降低了傳統(tǒng)試劑有的刺鼻氣味,并且對常見的實(shí)驗(yàn)干擾因素展現(xiàn)出了優(yōu)異的耐受性。貨號 E6120 作為其 100ml 的中等規(guī)模包裝,極其適合中小型實(shí)驗(yàn)室開展 384 孔板乃至 1536 孔板的高通量篩選工作。


第三部分:工作原理詳解

要深刻理解 ONE-Glo™ 系統(tǒng)的強(qiáng)大之處,我們需要從其底層的生物化學(xué)反應(yīng)機(jī)制說起。螢火蟲螢光素酶(Luciferase)是一種分子量約為 60 kDa 的單體蛋白,它能夠催化底物發(fā)生氧化反應(yīng),并將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。

1. 經(jīng)典的兩步發(fā)光機(jī)制

在經(jīng)典的螢火蟲螢光素酶反應(yīng)中,通常需要以下幾種核心底物:D-熒光素(D-Luciferin)、三磷酸腺苷(ATP)、鎂離子(Mg2?)以及氧氣。反應(yīng)過程主要分為兩步:

• 第一步(腺苷化反應(yīng)): 螢光素酶首先催化 D-熒光素與 ATP 結(jié)合,生成熒光素-腺苷酸中間體(Luciferyl-adenylate),同時釋放出一分子的焦磷酸(PPi)。

• 第二步(氧化發(fā)光反應(yīng)): 在氧氣的存在下,該中間體被氧化生成處于激發(fā)態(tài)的氧化熒光素(Oxyluciferin),當(dāng)激發(fā)態(tài)的氧化熒光素回到基態(tài)時,便會釋放出一個光子,產(chǎn)生我們?nèi)庋劭梢姷纳锇l(fā)光現(xiàn)象。

2. ONE-Glo™ 系統(tǒng)的化學(xué)改良

傳統(tǒng)的商用檢測試劑大多直接使用 D-熒光素作為底物。D-熒光素在水溶液中容易發(fā)生自發(fā)的非酶促氧化,這導(dǎo)致試劑在溶解后極不穩(wěn)定,需要現(xiàn)配現(xiàn)用,且伴隨著強(qiáng)烈的硫醇類刺激性氣味。

ONE-Glo™ 系統(tǒng)則采用了一種 Promega 保護(hù)的新型螢光素酶底物。這種底物經(jīng)過特殊的化學(xué)修飾,具有以下理化特性:

• 更強(qiáng)的抗自氧化能力: 即使在室溫或含氧環(huán)境中,該底物的自發(fā)降解速率也遠(yuǎn)低于 D-熒光素,從而賦予了試劑長期穩(wěn)定性。

• 更低的揮發(fā)性有機(jī)物(VOCs)釋放: 極大地消除了傳統(tǒng)試劑令人不適的氣味,改善了實(shí)驗(yàn)室人員的操作環(huán)境。

• 優(yōu)化的酶動力學(xué)曲線: 該底物與螢光素酶的結(jié)合效率更高,產(chǎn)生的光子流更強(qiáng),且“輝光(Glow-type)"持續(xù)時間更長(可達(dá) 40 分鐘以上),為高通量儀器的連續(xù)讀數(shù)留足了時間窗口。

當(dāng) ONE-Glo™ 試劑加入到含有螢光素酶報告基因的細(xì)胞樣品中時,試劑中的去污劑成分會瞬間溫和地裂解細(xì)胞膜,將細(xì)胞內(nèi)的螢光素酶釋放到溶液中。隨后,新型底物在酶的催化下迅速發(fā)生氧化反應(yīng),產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi)螢光素酶表達(dá)量呈嚴(yán)格正相關(guān)的發(fā)光信號。科研人員只需使用微孔板讀板機(jī)檢測發(fā)光強(qiáng)度(Relative Light Units, RLU),即可精準(zhǔn)計(jì)算出目標(biāo)基因的相對表達(dá)水平。


第四部分:產(chǎn)品核心特點(diǎn)深度解讀

1. 靈活便捷的儲存條件,打破冷鏈?zhǔn)`

對于常規(guī)的生物酶類試劑,嚴(yán)格的低溫冷凍往往是維持活性的手段。然而,ONE-Glo™ 系統(tǒng)在配方設(shè)計(jì)上實(shí)現(xiàn)了突破。數(shù)據(jù)顯示,其溶解后的 ONE-Glo™ 試劑在室溫(約 22°C)下可以穩(wěn)定存放長達(dá) 3 周,而在 2°C 至 10°C 的普通冰箱冷藏環(huán)境下更是可以穩(wěn)定保存 3 個月,期間試劑的功能性僅有約 12% 的自然衰減。這意味著研究人員不再需要頻繁地將試劑在冰盒與冰箱之間來回轉(zhuǎn)移,極大地簡化了日常實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備流程,同時也為自動化工作站的全天候連續(xù)運(yùn)行掃清了障礙。

2. 尊享清新操作環(huán)境,告別刺鼻異味

做過傳統(tǒng)螢光素酶實(shí)驗(yàn)的科研人員一定深有體會,普通 D-熒光素試劑在溶解和反應(yīng)過程中會釋放出一股濃烈的、類似于臭雞蛋或腐爛蔬菜的揮發(fā)性硫化物氣味。這不僅嚴(yán)重影響了實(shí)驗(yàn)室的空氣質(zhì)量,長期吸入還可能對實(shí)驗(yàn)人員的呼吸道造成刺激。ONE-Glo™ 的新型底物從根本上解決了這一痛點(diǎn),其在整個實(shí)驗(yàn)過程中幾乎不產(chǎn)生任何難聞氣味,為您和團(tuán)隊(duì)提供了一個更加舒適、健康的科研環(huán)境。

3. 抗擾能力,無視混合與分裝誤差

在 384 孔板或 1536 孔板的高通量實(shí)驗(yàn)中,機(jī)械臂的分液精度和加樣后的混勻力度很難做到孔與孔之間全一致。某些敏感的發(fā)光試劑在遭遇劇烈震蕩或形成微小氣泡時,發(fā)光信號會出現(xiàn)劇烈波動,導(dǎo)致數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性極差(High CV%)。ONE-Glo™ 試劑展現(xiàn)出了佳的物理耐受性,它對混合和分裝條件的變化極不敏感。無論是在手工操作中稍微搖晃了幾下,還是自動化設(shè)備留下了微小的氣泡,其最終的讀數(shù)都能保持高度的一致性和穩(wěn)定性,從而大幅提升了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠程度。

4. 專為高密度微孔板量身定制

隨著藥物篩選通量的提升,越來越多的實(shí)驗(yàn)室開始普及 384 孔板和 1536 孔板。在這些高密度孔板中,每孔的加樣體積往往被壓縮在幾微升到幾十微升之間,極小的液體體積使得蒸發(fā)效應(yīng)和熱散失變得尤為顯著。ONE-Glo™ 試劑憑借其獨(dú)特的緩沖體系和底物配方,即使在如此小體積、高密度環(huán)境下,依然能夠提供明亮且持久的發(fā)光信號,是開展 siRNA 文庫篩選、CRISPR 全基因組敲除篩選的理想搭檔。

5. 更強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)耐受力,弱化假陰性風(fēng)險

哺乳動物細(xì)胞的生長離不開復(fù)雜的培養(yǎng)基,而培養(yǎng)基中往往含有酚紅(pH 指示劑)、血清蛋白、各種氨基酸以及抗氧化劑(如維生素C、谷胱甘肽等)。這些物質(zhì)中,酚紅和維生素C恰恰是螢光素酶催化反應(yīng)的天敵,它們會通過淬滅自由基或直接消耗底物的方式來抑制發(fā)光信號。ONE-Glo™ 系統(tǒng)經(jīng)過特殊優(yōu)化,對這些常見的細(xì)胞培養(yǎng)基成分具有高的耐受閾值。研究人員甚至可以在不全移除培養(yǎng)基的情況下直接進(jìn)行檢測,這不僅節(jié)省了洗板的時間,更避免了因清洗不全或細(xì)胞脫落所帶來的數(shù)據(jù)偏差。


第五部分:儲存與運(yùn)輸條件

為了保證 ONE-Glo™ Luciferase Assay System (E6120) 的最佳性能,請務(wù)必嚴(yán)格遵守以下儲存與運(yùn)輸規(guī)范:

1. 未開封的原始試劑儲存

• ONE-Glo™ Luciferase Assay Buffer (100ml, 子貨號 E605B): 收到產(chǎn)品后,應(yīng)將其存放于 -30°C 至 -10°C 的低溫冰箱中。若短期內(nèi)(3個月內(nèi))頻繁使用,也可將其置于 2°C 至 10°C 的普通冷藏室,其功能性變化極小(約 10%)。

• ONE-Glo™ Luciferase Assay Substrate (1 vial, 子貨號 E606B): 凍干粉狀態(tài)極不穩(wěn)定,必須在 -30°C 至 -10°C 的環(huán)境下避光保存。

2. 運(yùn)輸條件

本產(chǎn)品在運(yùn)輸過程中會使用干冰或足量冰袋進(jìn)行包裝,以確保其始終處于規(guī)定的低溫區(qū)間內(nèi)。

3. 試劑復(fù)溶后的儲存(重要提示)

當(dāng)您將 Buffer 加入到 Substrate 凍干粉中,配制成 ONE-Glo™ Reagent(工作液)后,其儲存條件變得非常寬容:

• 室溫(約 22°C): 可穩(wěn)定保存 3 周。

• 冷藏(2°C 至 10°C): 可穩(wěn)定保存 3 個月。

• 冷凍(-20°C): 不建議反復(fù)凍融。一旦復(fù)溶,建議在有效期內(nèi)一次性用完或分裝保存。


第六部分:實(shí)驗(yàn)所需材料與試劑配制

1. 實(shí)驗(yàn)所需自備材料

• 表達(dá)螢火蟲螢光素酶的哺乳動物細(xì)胞(貼壁或懸浮均可)。

• 標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)體系(含血清的培養(yǎng)基,不含干擾性過高的抗氧化補(bǔ)充劑)。

• 可調(diào)量程移液器及無菌吸頭(如進(jìn)行高通量實(shí)驗(yàn),需配備多通道移液器或自動分液器)。

• 適用于發(fā)光檢測的白色不透明微孔板(推薦使用 Corning、Greiner 等品牌的白色底板,以減少孔間信號串?dāng)_)。

• 微孔板發(fā)光檢測儀(Luminometer),具備單次讀取或動力學(xué)讀取模式。

2. ONE-Glo™ 工作液的配制步驟

• 取出一瓶全解凍(或平衡至室溫)的 ONE-Glo™ Luciferase Assay Buffer (100ml)。

• 將 Buffer 全部倒入裝有 ONE-Glo™ Luciferase Assay Substrate (凍干粉) 的玻璃瓶中。

• 蓋緊瓶蓋,用手輕輕上下顛倒混勻,直至瓶底的白色凍干粉全溶解,溶液變?yōu)槌吻逋该鳡睿ù诉^程通常需要 1 至 2 分鐘)。

• 注意:請勿使用渦旋振蕩器(Vortex)劇烈震蕩,以免產(chǎn)生大量難以消除的泡沫,影響后續(xù)加樣精度。


第七部分:標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)操作流程 (SOP)

第一步:細(xì)胞培養(yǎng)與模型構(gòu)建

根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染或瞬時轉(zhuǎn)染了螢火蟲螢光素酶報告基因的細(xì)胞接種于合適的微孔板中。以 96 孔板為例,每孔接種 1×10? 至 2×10? 個細(xì)胞;以 384 孔板為例,每孔接種 5×103 個左右。將細(xì)胞置于 37°C、5% CO? 的培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng),待細(xì)胞貼壁并達(dá)到約 70% - 80% 的融合度時,進(jìn)行后續(xù)的藥物或基因處理。

第二步:施加實(shí)驗(yàn)干預(yù)

根據(jù)您的課題需求,向細(xì)胞中加入待測化合物(如藥物小分子、siRNA、質(zhì)粒等)或相應(yīng)的對照溶劑。繼續(xù)培養(yǎng)所需的時間(通常為 6 小時至 48 小時不等,視具體信號響應(yīng)動力學(xué)而定)。

第三步:去除培養(yǎng)基(可選)

如果您使用的是普通的非酚紅培養(yǎng)基,且細(xì)胞狀態(tài)良好,您可以直接跳過洗板步驟,帶著培養(yǎng)基進(jìn)行第四步。但如果您的培養(yǎng)基中含有高濃度的干擾物質(zhì),或者您追求低背景,可以使用移液器小心吸走舊培養(yǎng)基,并根據(jù)需要加入 20µl 至 50µl 的新鮮普通培養(yǎng)基或 PBS。

第四步:加入 ONE-Glo™ 檢測試劑

將配制好的 ONE-Glo™ Reagent 平衡至室溫。按照與孔內(nèi)原有液體體積 1:1 的比例加入檢測試劑。例如,如果孔內(nèi)留有 100µl 的培養(yǎng)基,則加入 100µl 的 ONE-Glo™ Reagent。如果是無培養(yǎng)基的干孔,則直接加入 100µl 試劑。

• 小型實(shí)驗(yàn): 使用多通道移液器快速加入。

• 高通量實(shí)驗(yàn): 使用自動分液器(如 Multidrop™)設(shè)定好流速和體積進(jìn)行分裝。

第五步:輕晃混勻與孵育

加樣完畢后,使用微孔板振蕩器(Orbital Shaker)以中等轉(zhuǎn)速(約 300-500 rpm)輕晃微孔板 2 至 5 分鐘,確保裂解液與細(xì)胞充分接觸并使酶促反應(yīng)達(dá)到平衡。或者,如果您使用的是可自動振蕩的讀板機(jī),也可以在進(jìn)艙前手動混勻。

第六步:檢測發(fā)光信號

將微孔板放入微孔板發(fā)光檢測儀中。設(shè)置儀器參數(shù):通常不需要設(shè)置激發(fā)光濾光片(因?yàn)槲灩馑孛甘巧锇l(fā)光,不需要激發(fā)),發(fā)射光檢測范圍設(shè)為全波長或 550nm - 600nm。建議積分時間設(shè)置為 0.5 秒至 1 秒每孔。記錄下各個孔位的相對發(fā)光單位(RLU)數(shù)值。


第八部分:本產(chǎn)品解決的實(shí)驗(yàn)痛點(diǎn)剖析

在過往的科研實(shí)踐中,許多實(shí)驗(yàn)室在使用傳統(tǒng)螢光素酶檢測系統(tǒng)時,常常陷入以下困境,而 ONE-Glo™ 正是為解決這些問題而生:

• 痛點(diǎn)一:試劑“見光死",半衰期太短

 傳統(tǒng)試劑溶解后必須在幾個小時內(nèi)測完,否則信號驟降。ONE-Glo™ 打破了這一問題,其長達(dá)數(shù)周的室溫穩(wěn)定性,讓您可以上午配液,下午甚至第二天再從容讀數(shù)。

• 痛點(diǎn)二:氣泡殺手,數(shù)據(jù)忽高忽低

 在快速加樣時,液體撞擊液面極易產(chǎn)生氣泡。傳統(tǒng)試劑遇到氣泡,光信號會被折射或遮擋,導(dǎo)致同一次實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)變異系數(shù)(CV%)居高不下。ONE-Glo™ 對物理擾動具有免疫力,即使帶有微量氣泡,讀數(shù)依然堅(jiān)挺。

• 痛點(diǎn)三:怕水又怕臟,基質(zhì)干擾大

 很多實(shí)驗(yàn)需要在含有高濃度血清或特定添加劑的培養(yǎng)基中進(jìn)行。傳統(tǒng)試劑一旦遇到酚紅或抗氧化劑,發(fā)光信號會被抑制 50% 甚至更多。ONE-Glo™ 擁有高的“抗污"能力,在復(fù)雜的培養(yǎng)體系中依然能保持信號的線性響應(yīng)。

• 痛點(diǎn)四:氣味熏天,通風(fēng)櫥里都扛不住

 實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)系統(tǒng)有時候也扛不住劣質(zhì)試劑的惡臭。ONE-Glo™ 的環(huán)保無味配方,讓您可以安心在超凈臺或普通實(shí)驗(yàn)臺上操作,不必時刻屏住呼吸。

• 痛點(diǎn)五:小體積檢測信號弱,蒸發(fā)惹的禍

 在 1536 孔板中,幾微升的試劑眨眼間就會蒸發(fā)變干。ONE-Glo™ 的緩沖體系能有效減緩蒸發(fā)帶來的影響,保證小體積下的信號強(qiáng)度。


第九部分:常見問題與解決方案 (Troubleshooting)

問題一:發(fā)光信號整體偏弱,甚至接近空白背景

• 可能原因: 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率過低;螢光素酶表達(dá)量本身極低;檢測試劑配制錯誤(如 Buffer 未全溶解底物);或者細(xì)胞數(shù)量過少。

• 解決方案: 優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件(如更換轉(zhuǎn)染試劑、調(diào)整 DNA 與轉(zhuǎn)染試劑比例);增加細(xì)胞接種密度;仔細(xì)檢查試劑配制步驟,確保凍干粉全化開;延長加樣后的孵育時間至 10 分鐘后再讀數(shù)。

問題二:實(shí)驗(yàn)組與對照組之間沒有顯著差異(無響應(yīng))

• 可能原因: 藥物或刺激因子劑量不足;作用時間不夠;報告基因載體構(gòu)建有誤(如啟動子序列缺失);或者細(xì)胞系對該通路不敏感。

• 解決方案: 進(jìn)行藥物的梯度稀釋測試,尋找最佳起效濃度;延長藥物處理時間;重新測序驗(yàn)證載體的準(zhǔn)確性;嘗試使用陽性對照質(zhì)粒(如 pGL3-Control)來確認(rèn)系統(tǒng)是否正常運(yùn)作。

問題三:數(shù)據(jù)重現(xiàn)性差,孔間差異極大(CV% > 20%)

• 可能原因: 加樣時產(chǎn)生了大量氣泡且未消除;微孔板震蕩混勻不均勻;細(xì)胞在鋪板時分布不均(貼壁細(xì)胞聚團(tuán))。

• 解決方案: 降低移液器的退吸速度,或使用反向移液法減少氣泡;確保微孔板在振蕩器上放置平穩(wěn);在鋪板前使用胰酶充分消化細(xì)胞,并用移液槍反復(fù)吹打制成真正的單細(xì)胞懸液。

問題四:標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系變差

• 可能原因: 螢光素酶濃度過高,發(fā)生了底物耗盡(Substrate depletion);或者檢測試劑過期失效。

• 解決方案: 對高表達(dá)的樣本進(jìn)行梯度稀釋后重測;在檢測高濃度樣本時,適當(dāng)增加 ONE-Glo™ Reagent 的加入量;檢查試劑的有效期及儲存溫度。

問題五:背景孔(Blank)讀數(shù)異常偏高

• 可能原因: 微孔板潔凈度不夠,有還原性物質(zhì)殘留;發(fā)光檢測儀的光路系統(tǒng)受到污染;或者 Buffer 受到熒光素酶的污染。

• 解決方案: 使用全新的無菌微孔板;定期清潔和維護(hù)讀板機(jī);確保 ONE-Glo™ 試劑瓶瓶口潔凈,取用后立即封口。

問題六:不同批次試劑之間存在系統(tǒng)誤差

• 可能原因: 不同批次間的底物活性存在微小統(tǒng)計(jì)學(xué)波動;或者實(shí)驗(yàn)操作人員發(fā)生了變動。

• 解決方案: 在進(jìn)行跨批次的大規(guī)模篩選實(shí)驗(yàn)時,務(wù)必在各批次中加入相同的質(zhì)控品(Control),以便在后期數(shù)據(jù)分析時進(jìn)行歸一化處理。

問題七:試劑在低溫下出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀

• 可能原因: ONE-Glo™ Buffer 中含有高濃度的鹽類或緩沖成分,在低溫冷凍下溶解度下降,屬于正常的物理現(xiàn)象。

• 解決方案: 將試劑瓶取出,置于室溫下自然回溫,并輕輕搖晃,待結(jié)晶全溶解、溶液變澄清后即可正常使用,不影響性能。

問題八:讀數(shù)時出現(xiàn)明顯的雙峰或信號延遲

• 可能原因: 發(fā)光檢測儀的參數(shù)設(shè)置不當(dāng)(如延遲時間 Delay Time 設(shè)置過長或過短);或者裂解過程不徹。

• 解決方案: 優(yōu)化儀器參數(shù),通常 Delay Time 設(shè)為 0 或 1 秒,Integration Time 設(shè)為 0.5 至 1 秒;延長微孔板的搖勻時間,確保細(xì)胞充分裂解。

問題九:細(xì)胞在加樣后大量漂浮或脫壁

• 可能原因: ONE-Glo™ 試劑中的去污劑濃度對某些極度脆弱的細(xì)胞系(如原代神經(jīng)元細(xì)胞、懸浮淋巴細(xì)胞)來說略高,導(dǎo)致膜結(jié)構(gòu)瞬間崩解。

• 解決方案: 嘗試用無血清培養(yǎng)基 1:1 稀釋 ONE-Glo™ Reagent 后再加入孔中;或者在加樣前先棄去大部分培養(yǎng)基,保留極少量液體作為緩沖。

問題十:長時間(>2小時)孵育后信號急劇下降

• 可能原因: 雖然 ONE-Glo™ 穩(wěn)定性佳,但在高溫(>30°C)環(huán)境下,或者底物濃度被極度稀釋時,仍可能發(fā)生緩慢降解。

• 解決方案: 盡量在室溫(20-25°C)環(huán)境下進(jìn)行操作;如果需要極長的孵育時間,建議分批上機(jī)檢測,每次只拿出當(dāng)前要測的板子。


關(guān)鍵詞Promega ONE-Glo 說明書、E6120 螢光素酶檢測系統(tǒng)、螢火蟲螢光素酶報告基因檢測、哺乳動物細(xì)胞發(fā)光實(shí)驗(yàn)、384孔板高通量篩選試劑、無氣味生物發(fā)光底物、細(xì)胞信號通路研究試劑盒、藥物研發(fā)報告基因檢測、ONE-Glo 使用方法、ONE-Glo 常見問題解決、穩(wěn)定型螢光素酶試劑、-20度儲存檢測試劑、低背景熒光素酶系統(tǒng)、Promega 中國代理、報告基因?qū)嶒?yàn)步驟、細(xì)胞轉(zhuǎn)染后檢測試劑、ONE-Glo 原理、E6120 貨號價格、高通量藥物篩選平臺、Promega 發(fā)光檢測技術(shù)


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??賣產(chǎn)品

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品名

規(guī)格

品牌

E6120

ONE-Glo™ Luciferase Assay System

100ml

Promega

V5111

Sequencing Grade Modified Trypsin

5x20ug

Promega

H5135

Tris Base, Molecular Biology Grade

2500g/瓶

Promega

V5113

Sequencing Grade Modified Trypsin

5*20ug

Promega

V1062

Chymotrypsin, Sequencing Grade

4*25ug

Promega

V5072

Trypsin/Lys-C Mix, Mass Spec Grade

100ug

Promega

V5117

Sequencing Grade Modified Trypsin

1*100ug

Promega

E2620

Bright-Glo™ Luciferase Assay System

100mL

Promega

V7820

High Capacity Magne® Streptavidin Beads

3ml

Promega

V1621

Asp-N, Sequencing Grade

2ug

Promega

VA1170

native-lysc-and-lysn

20ug

Promega

G7571

CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay

10 × 10ml

Promega

E2920

Dual-Glo® Luciferase Assay System

10ml

Promega

G7940

Bio-Glo™ Luciferase Assay System

100ml

Promega

V6962

UDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay

400 assays

Promega

G7573

CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay

10 × 100ml

Promega

V5071

Trypsin / Lys-C Mix, Mass Spec Grade

20ug

Promega

G7572

CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay

100ml

Promega

N1120

Nano-Glo® Luciferase Assay

100ml

Promega

G7570

CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay

10ml

Promega

E8130

ONE-Glo™ EX Luciferase Assay Sy

10X10ml

Promega

V1651

Glu-C, Sequencing Grade

50ug (5 × 10ug)

Promega

V1671

rLys-C, Mass Spec Grade

15ug

Promega

V5280

Trypsin Gold, Mass Spectrometry Grade

100ug

Promega

G1780

CytoTox 96® Non-Radioactive Cytotoxicity Assay

1000assays

Promega

V4831

PNGase F

500u

Promega

E1910

Dual-Luciferase® Reporter Assay System

100assays

Promega

M1705

M-MLV Reverse Transcriptase Protocol

50000U

Promega

V1881-10ug

Arg-C 酶

10ug

Promega

G3581

CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay

5,000 assays

Promega

VA1160

rAsp-N, Mass Spec Grade

10ug

Promega

G3580

CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (MTS)

1,000 assays

Promega

LS2052

Eastep™ RT Master Mix (5X)

200 reactions

Promega

V3121

Agarose, LE, Analytical Grade

100g

Promega

G8091

Caspase-Glo® 3/7 Assay System

10ml

Promega

N1662

NanoBRET™ Nano-Glo® Detection Systems

1000assays

Promega

V5011

AMP-Glo™ Assay

1000 Assays

Promega

L5070

Transcend™ Colorimetric Non-Radioactive Translation Detection System *(L5072+L5061)

30 reactions

Promega

E2610

Bright-Glo™ Luciferase Assay System

10ml

Promega

A6002

GoTaq® qPCR Master Mix

1,000 X 50ul reactions

Promega

V5073

Trypsin / Lys-C Mix, Mass Spec Grade

5*20ug

Promega

E2311

FuGENE® HD Transfection Reagent

1ml

Promega

N3040

Nano-Glo® HiBiT Lytic Detection System

10ml/100ml

Promega

D1521

Unmethylated Lambda DNA

250UG

Promega

V7511

IdeS Protease

5,000 units

Promega

N1091

Promoter-Driven Control NanoLuc® Luciferase Vectors

20ug

Promega

L4540

Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate System

30reactions

Promega

VA2161-5ug

ProAlanase, Mass Spec Grade, (0?2ug?ul)

5ug

Promega

G3582

CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay System Technical Bulletin

200次檢測,4ml(2個96孔板的量)

Promega

G9683

CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay

100ml

Promega

N2511

RNasin Ribonuclease Inhibitor Recombinant Protocol

ea

Promega

LS1040

Eastep™ Super Total RNA Extraction Kit

50 preps

Promega

N2515

rRNasin RNase Inhibitor

10,000u

Promega

P1712

Ribo m7G Cap Analog

25 A254 units

Promega

N2611

RNasin® Plus Ribonuclease Inhibitor

2500u

Promega

G9241

CellTiter-Glo® 2.0 Cell Viability Assay

10ml

Promega

V9102

ADP-Glo™ Kinase Assay

10,000 Assays

Promega

P1043

VivoGlo™ Luciferin, In Vivo Grade

1g

Promega

E1501

Luciferase Assay System, 10-Pack

1,000assays

Promega

G9072

NAD/NADH-Glo™ Assays

50ml

Promega

G8093

Caspase-Glo® 3/7 Assay System

10*10ml

Promega

V8911

P450-Glo™CYP3A4 Assay (Luciferin-PPXE)DMSO-Tolerant Assay

10ml

Promega

G7941

Bio-Glo™ Luciferase Assay System

10ml

Promega

V1061

Chymotrypsin, Sequencing Grade

25ug

Promega

V1891

Elastase

5mg

Promega

E2510

Steady-Glo® Luciferase Assay System

10ml

Promega

G8781

Magne™ Protein A Beads, 20% Slurry

1ml

Promega

P1300

RiboMAX™ Large Scale RNA Production Systems—SP6 and T7 Technical Bulletin

1system

Promega

E1320

pGL4.51[luc2/CMV/Neo] Vector Protocol

20ug

Promega

G9291

CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assay

5×10 ml

Promega

E1200

ProFection® Mammalian Transfection System

40reactions

Promega

M7401

GoTaq® G2 Hot Start Taq Polymerase

100u

Promega

D6001

GoTaq® MDx Hot Start Polymerase

100u

Promega

E-8110

ONE-Glo™ EX Luciferase Assay Sys

10ml

Promega

V6963

UDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay Technical Manual

4000 assays

Promega

V9571

ADP-Glo:trademark: Kinase Assay +MET Kinase Enzyme System

1 each

Promega

V6612

GSH/GSSG-Glo™ Assay

50ml

Promega

H5131

Tris Base, Molecular Biology Grade

500g

Promega

NV3261

IGF1R-NanoLucFusion Vector

20ug

Promega

G7891

CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Int. Assay

1000-4000 assays

Promega

E6110

ONE-Glo™ Luciferase Assay System

10ml

Promega

N1620

Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay System

100ml

Promega

E1531

Luciferase Cell Culture Lysis 5X Reagent

30ml

Promega

N2012

Nano-Glo® Live Cell Assay System

1000 assays

Promega

G4511

25bp DNA Step Ladder

100ug

Promega

G9071

NAD/NADH-Glo™ Assay

10ml

Promega

N4100

Nano-Glo® Fluorofurimazine In Vivo Substrate (FFz)

1each

Promega

E2940

Dual-Glo® 雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)

100ml

Promega

VA1061

Rapid-Digestion-Trypsin-and-Trypsin-LysC-Kits

100ug

Promega

V1501

cAMP-Glo™ Assay

300assays

Promega

V4106

DNA-PK Kinase Enzyme System

10ug

Promega

D1501

Lambda DNA

250mL/瓶

Promega

U1515

dNTPMix

1000ul

Promega

G6420

HDAC-GlorM |/ll Assays and Screening System

10ml

Promega

G6601

HaloTEVProtease

1000u

Promega

MC5005

Proteinase K (PK) Solution

4ml

Promega

VA1090

GDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay

200assays

Promega

A5000

GoScript™ Reverse Transcription System

50rxns

Promega

V1921

AMPK (A1/B1/G1) Kinase Enzyme System

10ug

Promega

V1961

ERK2 Kinase Enzyme System

10ug

Promega



上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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