chimerx新產(chǎn)品NXT Taq PCR試劑盒

CHIMERx現(xiàn)在提供了一個(gè)熱啟動(dòng)PCR試劑盒，旨在縮短PCR循環(huán)時(shí)間而又不影響產(chǎn)量或性能。NXT Taq PCR Kit包含現(xiàn)成的預(yù)混液，其中包括Hot Start NXT Taq DNA聚合酶，反應(yīng)緩沖液，MgCl2和dNTP。還包括無(wú)核酸酶的水和10X彩色加載溶液。NXT Taq PCR Kit可以與任何熱循環(huán)儀一起使用。

NXT Taq PCR試劑盒

chimerx 1108

$ 56.00

快速概述

熱啟動(dòng)PCR試劑盒，設(shè)計(jì)用于在任何熱循環(huán)儀上進(jìn)行快速循環(huán)PCR，而不會(huì)影響產(chǎn)量或性能

細(xì)節(jié)

提供的試劑

NXT  Taq PCR預(yù)混液（2x）包含：

• 熱啟動(dòng)NXT Taq DNA聚合酶 
• 反應(yīng)緩沖液
• 氯化鎂2
• dNTPs

水，無(wú)核酸酶的
10X彩色溶液

描述

• 甲 llows以獲得寬范圍的PCR產(chǎn)物的至多4個(gè)kb和從附加型或復(fù)雜的基因組DNA為10kb，分別
• 即用型溶液，包含熱啟動(dòng)  NXT  Taq DNA聚合酶，反應(yīng)緩沖液，MgCl 2  和dNTP
• 專為任何熱循環(huán)儀上的快速循環(huán)PCR設(shè)計(jì)
• 縮短PCR循環(huán)時(shí)間而不會(huì)影響產(chǎn)量或PCR性能
• 不需要重新設(shè)計(jì)引物
• 隨附10X Color Load溶液，可直接在凝膠上加載PCR反應(yīng)
• 在72°C下復(fù)制DNA，并在95°C下顯示40分鐘的半衰期
• 包含5'→3'核酸外切酶活性
• 缺乏3'→5'核酸外切酶活性
• 在3'末端添加額外的“ A”
• 抗Taq抗體在中等溫度下抑制聚合酶活性
• 在初始變性步驟中，聚合酶活性得以恢復(fù)。

應(yīng)用領(lǐng)域

• Taq DNA聚合酶和抗Taq抗體之間形成復(fù)合物，構(gòu)成了熱啟動(dòng)PCR的基礎(chǔ)，可方便地進(jìn)行室溫反應(yīng)。
• 與常規(guī)PCR組裝方法相比，熱啟動(dòng)PCR可以提高PCR反應(yīng)的特異性，靈敏度和產(chǎn)率。

筆記

• 不要使用大于20μl的反應(yīng)體積，因?yàn)檫@會(huì)干擾獲得成功結(jié)果所需的宜溫度梯度
• 使用前解凍，輕輕渦旋并短暫離心NXT Taq PCR Master Mix（2x），引物，DNA模板，以避免鹽濃度的局部差異
• 退火和延伸步驟每100 bp分別需要5 s和3 s
• 在室溫下設(shè)置PCR反應(yīng)
• 底漆可以單獨(dú)添加，也可以作為預(yù)先準(zhǔn)備的底漆混合物添加
• 渦旋樣品并短暫旋轉(zhuǎn)
• 反應(yīng)可以在室溫下放入熱循環(huán)儀中
• 使用10X Color Load Solution可使PCR反應(yīng)直接加載到凝膠上，而無(wú)需事先添加凝膠加載緩沖液。10X Color Load Solution包含凝膠加載試劑和兩種在電泳過程中分離的跟蹤染料（紅色染料和黃色染料）。在1％瓊脂糖凝膠中，紅色染料的遷移速率與600 bp DNA片段的遷移速率相同，而黃色染料的遷移速率高于20 bp。該染料不干擾大多數(shù)下游酶的應(yīng)用，但是建議在酶操作之前純化PCR產(chǎn)物。
• 在大多數(shù)情況下，無(wú)需在PCR反應(yīng)中添加添加劑。對(duì)于某些困難的目標(biāo)，例如：富含GC的序列，可以添加具有復(fù)雜二級(jí)結(jié)構(gòu)添加劑的序列（例如DMSO）以改善擴(kuò)增。使用濃度為2-8％的DMSO。如果需要，建議的起始DMSO濃度為3％
• 作為使用多少模板DNA的一般指南，請(qǐng)從少10 4  個(gè)目標(biāo)序列拷貝開始，以25-35個(gè)周期獲得信號(hào)（即1μg1 kb ds DNA等于9.1 x 10 11分子，1μg的大腸桿菌基因組DNA等于2 x 10 8分子，1μg人基因組DNA等于3 x 10 5分子）

儲(chǔ)存條件

在-20°C下儲(chǔ)存
產(chǎn)品在干冰上運(yùn)輸

分類目錄

聚合酶，嗜熱DNA聚合酶