angioproteomie cAP-0010說明書

更新時間：2019-12-09 點擊次數：2922

angioproteomie cAP-0010說明書

人視網膜微血管內皮細胞

Human Retinal Microvascular Endothelial Cells

Item#:

cAP-0010

Size	Price
1.0 Frozen Vial	$600.00

訂單信息
產品名稱	人視網膜微血管內皮細胞（HRMVEC）
目錄號	cAP-0010
產品格式	冷凍瓶
細胞數量	> 5x10 [5]個細胞/小瓶
一般信息HRMVEC（cAP-0010）細胞是從正常人視網膜組織中分離出來的。將細胞裝在冷凍小瓶中（第3代提供細胞）。推薦使用內皮細胞生長培養基（EGM，包含10％的血清和生長補充劑，cAP-02）進行細胞培養，按照以下詳細方案進行培養時，這些細胞的小平均群體倍增水平> 20。
細胞的表征
1.	細胞質VWF /因子VIII免疫熒光陽性> 95％
2.	免疫熒光檢測Di-I-Ac-LDL細胞質攝取> 95％陽性
3.	細胞質PECAM1免疫熒光陽性> 95％
4.	HRMVEC對HIV-1，HBV，HCV和支原體呈陰性
產品使用情況單元僅供研究使用。
用干冰包裝運輸冷凍瓶。
到達細胞的處理當您收到裝有冷凍小瓶中的細胞的干冰包裝時，請將冷凍小瓶中的細胞轉移到-80C冷凍室中進行短期保存，或者將其移入液氮罐中進行長期保存。
解凍細胞和亞培養的協議
a）	T25燒瓶的預涂-將2ml快速涂層溶液（cAP-01）加入T25燒瓶中，以覆蓋燒瓶的整個表面，5分鐘后，通過抽吸處理過量的涂層溶液，準備使用燒瓶（盡管可以使用包含其他細胞外基質（即明膠，膠原蛋白和纖連蛋白）的溶液，但請確保事先優化條件）。
B）	首先在37°C水浴中解凍冷凍的細胞瓶，然后將細胞轉移到裝有10ml cAP-02培養基的預涂T25燒瓶中，細胞通常會匯合過夜，并準備進行傳代。
C）	要傳代細胞，請在T25燒瓶中用5ml HBSS（RT）沖洗兩次。然后將2ml胰蛋白酶/ EDTA（RT）（cAP-23）加入一個T25燒瓶中；吸出后在20秒內輕輕處置過量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。
D）	將T25燒瓶中的細胞在室溫或37°C下放置1分鐘（大多數細胞通常會在1-2分鐘內從表面分離；或在顯微鏡下監控細胞，直到大多數細胞被聚集起來，然后輕輕敲擊燒瓶）靠在工作臺表面上，在顯微鏡下監控時，細胞會在燒瓶表面上移動。
E）	加入5ml胰蛋白酶中和緩沖液，并通過800g離心5分鐘使細胞旋轉。
G）	用10或15ml cAP-2培養基重懸細胞沉淀，然后將5 ml分別轉移到2或3個預涂的T25燒瓶中（對于1/2至1/3的繼代培養比例）。
H）	每2或3天更換培養基，通常在7天內（當以1/3的比例分裂時）融合細胞。
I）	要準備靜態細胞，當細胞幾乎匯合時，請在實驗前約8-12小時用含有0.5％FBS的內皮基礎培養基（EBM，cAP-03）代替cAP-02。