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angioproteomie cAP-0010說明書

更新時間:2019-12-09      點擊次數:2790

angioproteomie cAP-0010說明書

人視網膜微血管內皮細胞

Human Retinal Microvascular Endothelial Cells

Item#:

cAP-0010

SizePrice
1.0 Frozen Vial$600.00

 

訂單信息
產品名稱人視網膜微血管內皮細胞(HRMVEC)
目錄號cAP-0010
產品格式冷凍瓶
細胞數量> 5x10 [5]個細胞/小瓶
一般信息HRMVEC(cAP-0010)細胞是從正常人視網膜組織中分離出來的。將細胞裝在冷凍小瓶中(第3代提供細胞)。推薦使用內皮細胞生長培養基(EGM,包含10%的血清和生長補充劑,cAP-02)進行細胞培養,按照以下詳細方案進行培養時,這些細胞的小平均群體倍增水平> 20。
細胞的表征
1.細胞質VWF /因子VIII免疫熒光陽性> 95%
2.免疫熒光檢測Di-I-Ac-LDL細胞質攝取> 95%陽性
3.細胞質PECAM1免疫熒光陽性> 95%
4.HRMVEC對HIV-1,HBV,HCV和支原體呈陰性
產品使用情況單元僅供研究使用。
用干冰包裝運輸冷凍瓶。
到達細胞的處理當您收到裝有冷凍小瓶中的細胞的干冰包裝時,請將冷凍小瓶中的細胞轉移到-80C冷凍室中進行短期保存,或者將其移入液氮罐中進行長期保存。
解凍細胞和亞培養的協議
a)T25燒瓶的預涂-將2ml快速涂層溶液(cAP-01)加入T25燒瓶中,以覆蓋燒瓶的整個表面,5分鐘后,通過抽吸處理過量的涂層溶液,準備使用燒瓶(盡管可以使用包含其他細胞外基質(即明膠,膠原蛋白和纖連蛋白)的溶液,但請確保事先優化條件)。
B)首先在37°C水浴中解凍冷凍的細胞瓶,然后將細胞轉移到裝有10ml cAP-02培養基的預涂T25燒瓶中,細胞通常會匯合過夜,并準備進行傳代。
C)要傳代細胞,請在T25燒瓶中用5ml HBSS(RT)沖洗兩次。然后將2ml胰蛋白酶/ EDTA(RT)(cAP-23)加入一個T25燒瓶中;吸出后在20秒內輕輕處置過量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。
D)將T25燒瓶中的細胞在室溫或37°C下放置1分鐘(大多數細胞通常會在1-2分鐘內從表面分離;或在顯微鏡下監控細胞,直到大多數細胞被聚集起來,然后輕輕敲擊燒瓶)靠在工作臺表面上,在顯微鏡下監控時,細胞會在燒瓶表面上移動。
E)加入5ml胰蛋白酶中和緩沖液,并通過800g離心5分鐘使細胞旋轉。
G)用10或15ml cAP-2培養基重懸細胞沉淀,然后將5 ml分別轉移到2或3個預涂的T25燒瓶中(對于1/2至1/3的繼代培養比例)。
H)每2或3天更換培養基,通常在7天內(當以1/3的比例分裂時)融合細胞。
I)要準備靜態細胞,當細胞幾乎匯合時,請在實驗前約8-12小時用含有0.5%FBS的內皮基礎培養基(EBM,cAP-03)代替cAP-02。

 

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