（一）佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)的動物模型

1.模型概述： 此模型是細菌學(xué)家Freund于50年代創(chuàng)立，又稱福氏佐劑關(guān)節(jié)炎，福氏佐劑分為*佐劑(CFA)和不*佐劑(IFA)。福氏佐劑是將液體石蠟與無水羊毛脂按2：1或6：4比例混合的混合液1ml，高壓滅菌，加入8O℃ 滅活1h的減毒卡介苗或干燥結(jié)核菌10 mg制成。不加卡介苗的為不*佐劑。

2.模型制備：造模多采用大鼠，足跖部皮下注射法：將液體石蠟高壓滅菌，BCG 80℃ 滅活1h，把BCG加入液體石蠟配成10 g•L－1的乳劑，充分碾磨、混勻，即得CFA，于大鼠左后足跖皮內(nèi)注射CFA 01ml致炎［1515］。原發(fā)病變主要表現(xiàn)為致炎局部的炎癥反應(yīng)，續(xù)發(fā)病變一般于致炎后10～20天左右出現(xiàn)，20天左右達到高峰，病理改變?yōu)榛は陆M織炎癥，滑膜增生，血管翳形成。軟骨破壞。4周后，關(guān)節(jié)紅腫減退，骨質(zhì)減少，新骨形成，關(guān)節(jié)間隙變窄。形成不可逆的關(guān)節(jié)改變。

（二） Ⅱ 型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)模型

1.模型概述：CIA模型是Trentham等1977建立的實驗性關(guān)節(jié)炎動物模型，20世紀80年代至90年代初期，國外大量重復(fù)實驗并在臨床表現(xiàn)、病理組織學(xué)和免疫學(xué)等方面進行了廣泛深入的研究。雞、小牛、大鼠的Ⅱ型膠原(CⅡ)均能引起關(guān)節(jié)炎。選擇的動物一般為嚙齒類和靈長類。CⅡ大量存在于關(guān)節(jié)軟骨中，同時也存在于視網(wǎng)膜和玻璃體中，CⅡ是一種與免疫系統(tǒng)隔絕的蛋白質(zhì)，但在某些病理條件下可作為一種自身抗原呈現(xiàn)出來。Trenthem發(fā)現(xiàn)50％的RA患者血清中存在有抗CⅡ的自身抗體，這表明CⅡ可誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎性質(zhì)的自身免疫反應(yīng)。根據(jù)這些理論人們用CⅡ免疫大鼠或小鼠，從而成功地建立了ClA模型。

      以Ⅱ型膠原免疫所致動物有兩個要素，一是保持Ⅱ型膠原的自然狀態(tài)，即完整的三股螺旋，另外就是有佐劑的參與。Ⅱ型膠原可以是同種的，也可以是異種的。Ⅱ型膠原免疫誘發(fā)關(guān)節(jié)炎的產(chǎn)生和發(fā)展都依賴于自身T 細胞和B細胞的激活。去除T 細胞或去除B細胞，動物都不能用Ⅱ型膠原免疫誘發(fā)關(guān)節(jié)炎病變。

2.模型制備：Ⅱ型膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型是DE Trentham 等于1977年創(chuàng)立的，將純化的天然膠原溶于0.1M 的醋酸制成濃度1mg／ml的溶液，與等量的福氏佐劑或不*佐劑混合成穩(wěn)定的乳劑。用1ml乳劑分4～6個部位注射大鼠背部皮內(nèi)，注射部位會出現(xiàn)小潰瘍(在7～1O天后自愈)，21天后，可將0．5mg膠原溶于0．5ml 1M 的醋酸中注入大鼠腹腔再次免疫。初次注射后14～60天后，出現(xiàn)關(guān)節(jié)紅腫，通常發(fā)生于關(guān)節(jié)遠端，后足踝關(guān)節(jié)是zui常累的部位。CIA 急性期病理改變可分為兩期，免疫1O天后，關(guān)節(jié)內(nèi)只有一些纖維沉積物而滑膜細胞無改變，12天后，肉眼可見踝關(guān)節(jié)紅腫，2O％ 的膝關(guān)節(jié)出現(xiàn)紅腫．光鏡下滑膜細胞增多．層數(shù)增至3～7層，并向軟骨骨面爬行，滑膜及滑膜下組織有纖維沉積。電鏡下則見滑膜細胞變圓。細胞間接觸減少，絲狀偽足增多．細胞內(nèi)溶酶體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增大、增多。19天后進入第二期。增生滑膜由6～10μm 增厚至200～250μm，形成血管翳，其中有大量單核細胞、多形核巨細胞、巨噬細胞，在微血管周圍形成微膿腫，可見到單核細胞侵入軟骨連接處的軟組織。6～7周后，炎癥進入慢性期，水腫仍存在，浸潤的細胞以CD 的T 細胞為主，關(guān)節(jié)內(nèi)出現(xiàn)瘢痕，顆粒狀增生組織，軟骨及軟骨下骨被破壞，zui后(6個月)，導(dǎo)致關(guān)節(jié)強直。

（三）卵蛋白誘導(dǎo)性動物模型

模型制備：雞卵蛋白溶液(20mg／ml)、卡介苗和福氏不*佐劑(三者比例lml：2ml：lm1)混合在1500r／min勻漿器下制成混合乳劑。將混合乳劑1ml在兔肩胛間區(qū)分5個部位皮下注射，2周及4周分別加強免疫1次，然后雙膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)各注射5mg卵蛋白。病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，在雙膝注射卵蛋白后第1天關(guān)節(jié)直徑和表面溫度大幅度上升．以后緩慢下降，至14～21天后達到平臺期。鏡下可觀察到滑膜細胞明顯增生，排列紊亂并有WBC 浸潤，淋巴細胞大量增生，纖維組織亦增生，部分軟骨缺損。其免疫過程大致為，在致敏兔關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射一定量抗原后，產(chǎn)生的免疫復(fù)合物沉積在關(guān)節(jié)滑膜上，注射后數(shù)小時，滑膜上大量多核細胞浸潤。然后誘導(dǎo)細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，引起大量單核細胞浸潤，從而形成慢性滑膜炎、滑膜增生，淋巴細胞生發(fā)中心形成針對免疫抗原的*性抗體。隨后，關(guān)節(jié)軟骨上生成血管翳，侵蝕骨和軟骨，其病理過程類似RA。

（四）PIA

      PIA是以體液免疫和細胞免疫異常為特征的血清陽性的實驗性關(guān)節(jié)炎，是由CD4 T細胞介導(dǎo)，Pristante使多克隆T細胞擴增，進一步引起淋巴結(jié)變，浸潤滑膜。因此選擇性T細胞浸潤炎癥性關(guān)節(jié)是PIA易感性的重要因素。

（五）DIA

     由DDA誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠也是研究關(guān)節(jié)炎的動物模型。當(dāng)皮下注射2 mg溶于PBS的DDA時，可以在Lewis和DA大鼠中誘導(dǎo)多關(guān)節(jié)炎，但發(fā)病率低，病情嚴重程度較輕；而注射2 mg混合非*弗氏佐劑的DDA，能誘導(dǎo)嚴重多關(guān)節(jié)炎，Lewis大鼠發(fā)病率為100％。DIA組織學(xué)表現(xiàn)為關(guān)節(jié)部位細胞浸潤，滑膜充血，肉芽組織增生，軟骨破壞和骨質(zhì)變形。用DIA大鼠淋巴細胞能成功轉(zhuǎn)移同系鼠發(fā)生多關(guān)節(jié)炎。

（六）ACII

     為佐劑角又菜膠誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎動物模型，其誘導(dǎo)的方法是：以小鼠為例，在實驗條件下。選擇有效、敏感小鼠，先在皮下注射CFA，隨后在不同時間，于足跖皮下注射角叉菜膠。實驗表明，大鼠與小鼠之間對免疫誘導(dǎo)的應(yīng)答不同，在DAB／1小鼠表現(xiàn)為足爪及踝關(guān)節(jié)的腫脹，于注射角叉菜21d后更明顯，不依賴于應(yīng)用炎性劑的特點，其組織病理變化與大鼠相似，都有皮下充血、淋巴細胞浸潤及肉芽腫的形成。ACⅡ模型主要用于炎**物的篩選等。

虎 克自身免疫性疾病實驗動物模型

    Hookelabs是的自身免疫性疾病實驗動物模型及其相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)企業(yè)，其創(chuàng)始人Suzana Marusic博士曾在惠氏制藥長期擔(dān)任炎性靶點驗證實驗室的主管，負責(zé)哮喘和自身免疫性疾病的研究，研發(fā)制備出高度相似性的哮喘和實驗性自身免疫性腦脊髓炎小鼠模型，并以此驗證了多個藥物靶點。Suzana Marusic憑借其多年來在T細胞分離培養(yǎng)、細胞免疫、外周耐受機制及免疫相關(guān)疾病和腫瘤研究的豐富經(jīng)驗，創(chuàng)立了虎克實驗動物模型公司，致力于為科研和藥物研發(fā)提供的自身免疫性實驗動物模型建立試劑盒，以及相關(guān)的實驗動物組織和血清。公司目前的實驗動物模型主要包括膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型、實驗性自身免疫性腦脊髓炎模型、系統(tǒng)紅斑狼瘡、炎性腸病等模型的制備試劑盒，以及多種免疫狀態(tài)下動物組織和血清樣本。虎克實驗動物模型提供的模型制備試劑盒以預(yù)充免疫原的注射器為主，操作簡單，結(jié)果可靠，可重復(fù)性高。

上海起發(fā)實驗試劑有限公司專業(yè)從事生命科學(xué)研究領(lǐng)域產(chǎn)品代理及部分生物產(chǎn)品自主研發(fā)，以為科研人員提供高品質(zhì)科研產(chǎn)品為己任，是您值得信賴的科研伙伴！
     

一、膠原誘導(dǎo)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型CIA

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Rheumatoid arthritis (RA)是一種常見的自體免疫性疾病，多見于關(guān)節(jié)部位，但在心臟結(jié)締組織、血管、肺、眼皮膚及腎臟均有發(fā)現(xiàn)。RA發(fā)病中女性多余男性（約2：1），其癥狀包括疼痛、腫脹感和僵硬、粘連、關(guān)節(jié)面糜爛、骨吸收關(guān)節(jié)變形甚至失去功能。

虎克實驗室在RA實驗動物模型的建立上有著豐富的經(jīng)驗，其核心動物模型膠原蛋白誘導(dǎo)的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型（CIA）即是常用的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型，該模型常用DBA/1小鼠建立，但是也可用B10.R111 小鼠, B10.Q 小鼠及Lewis 大鼠建立。

1、虎克公司提供的CIA模型誘導(dǎo)試劑盒

四種試劑盒區(qū)別在使用不同來源的膠原蛋白誘導(dǎo)，斜線后為相應(yīng)的免疫佐劑。

2、CIA免疫流程

3、CIA模型評價指標

虎克公司其他產(chǎn)品LIST